Ultra Nuclease GMP-pola
Hejmara pisîkê: HC2016A
UltraNuclease GMP-pola di Escherichia coli (E.coli) de ji hêla endezyariya genetîkî ve hatî çêkirin û di bin hawîrdorên GMP-ê de têne amadekirin û paqij kirin.Ew dikare di lêkolîna zanistî de vîskozîteya supernatant û lîzata hucreyê kêm bike, karûbarê paqijkirina proteînê zêde bike û lêkolîna fonksiyonê ya proteînê zêde bike.Hilber di heman demê de dikare bermahiyên asîda nukleîk a mêvandar bi pola pg-ê kêm bike, performans û ewlehiya hilberên biyolojîk ên serîlêdanê, tevî paqijkirina vîrusê, çêkirina vakslêdanê, û hilberîna dermansaziya proteîn/polîsakarîdê baştir dike.Wekî din, hilber dikare di tedawiya hucreyê û pêşkeftina vakslêdanê de jî were sepandin da ku pêşî li kombûna şaneyên mononukleer ên xwînê yên periferîkî (PBMC) bigire.
UltraNuclease di forma reagentek sterilîzekirî de, di tamponê de (20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glycerin), bi xuyangiya şilekek bêreng û zelal tê peyda kirin.Ev hilber ji hêla daxwazên pêvajoya GMP-ê ve tête hilberandin û di forma şikilî de tête peyda kirin.
Components
UltraNuclease GMP-pola (250 U/μL)
Şertên Storage
Hilber bi qeşa hişk tê şandin û du salan di -25℃~-15°C de tê hilanîn.
Ger hilber were vekirin û zêdetirî hefteyekê di 4℃ de were hilanîn, em fîlterkirinê pêşniyar dikinhilber ji bo pêşîlêgirtina qirêjiya mîkrobîkî.
Specifications
| Hostê îfadeyê | E. coli recombinant bi gena UltraNuclease |
| Giraniya molekulî | 26,5 kDa |
| xala soelektrîkê | 6.85 |
| Paqijiya | ≥99% (SDS-PAGE) |
| Storage Buffer | 20mM Tris-HCL pH 8,0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glycerin |
|
Unit Definition | Pênaseya yekîneya Çalakiyê (U) mîqdara enzîmê ye ku tê bikaranîndi 2.625 mL de di 30 hûrdeman de nirxa vegirtinê ya ΔA260 bi 1.0 biguherîninpergala reaksiyonê ya li 37 ℃ bi pH 8.0 (wekheviya tevhevkirina xwarinê37 μg ADNya spermaya salmon di nav oligonukleotîd de). |
Instructions
1. Nimûne Berhevkirî
Hucreyên pêgirtî: navgînê derxînin, hucreyan bi PBS bişon, û supernatant jêbirin.
Hucreyên suspension: bi santrîfugê şaneyan berhev dikin, bi PBS şaneyan bişon, di 6000 de santrîfuj dikin.rpm ji bo 10 min, pellet berhev bikin.
Escherichia coli: bakteriyan bi santrîfugasyonê kom bikin, carekê bi PBS bişon, di 8000 de santrîfuj bikin.rpm ji bo 5 min, û pellet kom bikin.
2. Tedawiya Nimûne
Pelên hucreyê yên hatine berhevkirin bi tampon lîzê bi rêjeya girseya (g) berbi volga (mL) 1: (10-20), an jî bi rêbazên mekanîkî an kîmyewî li ser cemedê an jî li germahiya odeyê (1 g peleta şaneyê bi qasî
109 hucre).
3. Dermankirina Enzîmê
1-5 mM MgCl li pergala reaksiyonê zêde bikin û pH-ê di 8-9 de bicîh bikin.
UltraNuclease li gorî rêjeya 250 Yekîneyan zêde bikin da ku 1 g pelên hucreyê bişewitînin, di 37℃ de zêdetirî 30 hûrdeman inkub bikin.Ji kerema xwe li forma "Dema Reaksiyonê ya Pêşniyarkirî" bigerin da ku hûn hilbijêrindema dermankirinê.
4. Supernatant Berhevkirî
Bi 12,000 rpm 30 deqeyan santrîfuj bikin û supernatant berhev bikin.
Nîşe: Ger çareserî asîdî an alkalîn be, an jî pîvazên xwê, deterjant, andenaturant, ji kerema xwe doza enzîmê zêde bikin an jî li gorî wê dema dermankirinê dirêj bikin.
Rewşa reaksiyonê ya pêşniyar kirinons
| Parametre | Rewşa Optimal | Rewşa bandorker |
| Mg²+Concentration | 1-5 mM | 1-10 mM |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Germî | 37℃ | 0-42℃ |
| DTT Concentration | 0-100 mM | >0 mM |
| Berhevkirina Mercaptoetanol | 0-100 mM | >0 mM |
| Tevliheviya Cation Monovalent | 0-20 mM | 0-150 mM |
| Fosfat lon Concentration | 0-10 mM | 0-100 mM |
Pêşniyar kirin Bersivî Dem (37℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| Rêjeya UltraNuclease (Kevbûna dawîn) | Dema Reaksiyonê |
| 0,25 U/ml | > 10 h |
| 2,5 U/ml | >4h |
| 25 U/ml | 30 min |
Têbînî:
Ji kerema xwe PPE-ya pêwîst, cil û bergên laboratîfê yên weha li xwe bikin, da ku tenduristî û ewlehiya we misoger bikin!
