Inhibitor Rnase (Bê glycerol)
Inhibitorê RNase ya Murine frensek RNase ya mûşîyê ya rekombînant e ku ji E.coli hatî eşkere kirin û paqij kirin.Ew bi girêdana ne-kovalentî bi rêjeyek 1:1 bi RNase A, B an C ve girêdide, bi vî rengî çalakiya sê enzîman asteng dike û RNA ji hilweşandinê diparêze.Lêbelê, ew li dijî RNase 1, RNase T1, S1 Nuclease, RNase H an RNase ji Aspergillus ne bandor e.Inhibitorê RNase ya Murine ji hêla RT-PCR, RT-qPCR û mRNA IVT ve hate ceribandin, û bi cûrbecûr transkriptazên Reverse yên bazirganî, DNA polymerases û RNA polymerases re hevaheng bû.
Li gorî înhîbîtorên RNase yên mirovî, frenkera RNase ya mûşî du sîsteînên ku ji oksîdasyonê re pir hesas in ku dibe sedema neçalakkirina înhîbîtorê vedihewîne.Ev dihêle ku ew di tansiyonên kêm ên DTT (kêmtir ji 1 mM) de domdar be.Ev taybetmendî wê ji bo karanîna di reaksiyonên ku tansiyonên bilind ên DTT li hember reaksiyonê nebaş e (mînak RT-PCR-a-dema rastîn) minasib dike.
Asepanê
Ev hilber dikare bi berfirehî di her ceribandinê de were bikar anîn ku têde mudaxelekirina RNase gengaz e ku ji hilweşandina RNA dûr bixe, wek:
1.First-strand senteza cDNA, RT-PCR, RT-qPCR, hwd.;
2. Di transkripsiyona/wergera in-vitro de ARN-ê ji hilweşandinê biparêze (mînak dubarekirina vîrusê di vitro de);
3.Di dema veqetandin û paqijkirina RNA de astengkirina çalakiya RNase.
Şertên Storage
Li -25～-15℃ hilînin;
Cîklên cemidî-helandinê ≤ 5 caran;
1 sal derbasdar e.
Unit pênase
Yek yekîneyek wekî mîqdara RNase Inhibitor tê pênase kirin ku ji bo astengkirina çalakiya 5 ng RNase A bi 50% hewce ye.
Giraniya molekulî
RNase Inhibitor (bê glycerol) proteînek 50 kDa ye.
Kontrola kalîteyê
Exonuclease Çalakî:
Inkubasyona 40 U enzîmê bi 1 μg λ-Hind III ADN-ya digestê ya 16 demjimêran li 37°C, wekî ku ji hêla elektroforeziya gêlê ve hatî destnîşan kirin, nehişt ku ADN-ê hilweşîne.
Çalakiya Endonuclease:
Inkubasyona 40 U enzîmê bi 1 μg λ DNA ji bo 16 saetan li 37 ° C, wekî ku ji hêla elektroforeziya gel ve hatî destnîşan kirin, nehişt ku ADN-ê hilweşîne.
Nicking Çalakî:
Inkubasyona 40 U ya enzîmê bi 1 μg pBR322 ji bo 16 demjimêran li 37 ℃, wekî ku ji hêla elektroforeziya gel ve hatî destnîşan kirin, nehişt ku ADN-ê hilweşîne.
RNase Çalakî:
Inkubasyona 40 U ya enzîmê bi 1,6 μg MS2 RNA ji bo 4 demjimêran li 37 ℃, wekî ku ji hêla elektroforeziya gel ve hatî destnîşan kirin, nehişt ku RNA-yê hilweşîne.
E.coli DNA:
40 U enzîm ji hêla TaqMan qPCR ve tê tespît kirin.ADNya E.coli ≤ 0. 1pg/40U ye.
Notes
1. Ji bo pêşîlêgirtina neçalakbûna enzîmê bi tundî nehejînin û nehejînin.
Inhibitor 2.RNase di germahiyên ji 25℃ heta 55℃ de çalak e û di ≥65℃ de neçalak e.
3. Çalakiya RNase H, RNase 1, û RNase T1 nayê asteng kirin.
4. Rêjeya pH ya ji bo astengkirina çalakiya RNase berfireh e (di pH 5-9 de çalak e), di pH 7-8 de çalakiya herî zêde nîşan dide.
