Multiplex Yek Step RT-qPCR Premix
Terîf
Hejmara pisîkê: HCR5141A
Multiplex One Step RT-qPCR Premix Kitek PCR-ya jimareyî ya piralî ye ku li ser RNA-yê wekî şablonê ye.Di ceribandinê de, veguheztina berevajî û PCR ya hejmarî di heman lûleya reaksiyonê de têne kirin, operasyona ceribandinê hêsan dike û xetera gemariyê kêm dike.Sêwirana bêhempa ya tevliheviya tampon û enzîmê dikare di pergala lyophilized yek-gavekî de were bikar anîn.Kit ji bo senteza bikêrhatî ya cDNA-ya yekem stûna yekem bi karanîna Taq DNA Polymerase ya hotstart-ê ji bo zêdekirina mîqdar bikar tîne.Ew tamponek reaksiyonê ya xweşbînkirî, tevlihevkirina enzîman hwd. vedihewîne, û faktorên ku bi bandor zêdekirina PCR-ya ne-taybetî asteng dikin û kargêriya zêdekirina reaksiyonên qPCR yên pirjimar zêde dikin, hatin zêdekirin, ku zêdekirina pirjimar a fluorescence gengaz dike di heman demê de ku kargêriya zêdekirina primeran misoger dike.
Components
| Nav |
| 1. Lyo-Buffer |
| 2. Têkelê Lyo-Enzîm |
| 3. Lyo parastin |
Rewşa veguhastinêion
A: Lyo-buffer û parastin: -25 ~ -15 ℃, jiyana refikê 1 sal e.
B: Tevlihevkirina Lyo-enzîmê, 2-8 ℃, heyama rafê 6 meh e.
Telîmata operasyonê
1. Pergala Reaksiyonê (25μL wekî mînak bistînin)
| Components | Volume (μL) | Koncentrasyona dawî |
| Lyo-Buffer | 6 | 1* |
| Lyo-Enzyme Mix | 1 | - |
| Lyo-Protectant | 8 | - |
| Primer Mix (10μM) | 1 | 0,1- 1mM |
| Probe Mix (10μM) | 0.5 | 0,05-0,5uM |
| ARN Şablon | 5 | - |
| DEPC H2O | Heta 25 | - |
2. Protokola Bisiklêtê ya Optimized
1) Protokola Bisiklêtê ya Standard
| Qonaxa reaksiyonê | Germî | Dem | Zîvirok | |
| 1 | Veguheztina berevajî | 50°Ca | 10min | 1 |
| 2 | Denaturasyona destpêkê | 95°C | 5min | 1 |
| 3 | Reaksiyona amplification | 95°C | 15 sec | 45 çerx |
| 60°Cb | 30 secc |
2) Protokola Bisiklêta Bilez
|
| Qonaxa reaksiyonê | Germî | Dem | Zîvirok |
| 1 | Veguheztina berevajî | 50°Ca | 2min | 1 |
| 2 | Denaturasyona destpêkê | 95°C | 2 sec | 1 |
| 3 | Reaksiyona amplification | 95°C | 1sec |
45 çerx |
| 60°Cb | 13 secc |
Not:
a) Gara paşî transkrîpsîyon: Germahiya dikare ji bo 10-15 deqîqeyan 42°C an 50°C hilbijêre.
b) Reaksiyona amplification: Germahî li gorî nirxa Tm ya primerên sêwirandî tê sererast kirin.
c)Fluorescence nîşan bidestxistinî: Ji kerema xwe prosedûra ceribandinê li gorî hewcedariyên xwe bicîh bikinmanual instrument.
Agahiyên Teknîkî / Taybetmendî
| Destpêka Germ | Destpêka germ a çêkirî |
| Metoda Detection | Vedîtina primer-sondê |
| Rêbaza PCR | Yek gav RT-qPCR |
| Cureyê nimûneyê | ARN |
Têbînî
1. Ev hilber tenê ji bo karanîna lêkolînê ye.
2. Ji kerema xwe PPE-ya pêwîst, wek kiras û destikên laboratîfê li xwe bikin, da ku tenduristî û ewlehiya we misoger bikin!
