Wild Taq DNA Polymerase
Taq DNA Polymerase ji Thermus aquaticus YT-1 DNA polîmerazek termostable e, ku xwedan çalakiyek polîmerazê 5'→3' û çalakiyek endonukleazê ya 5' ye.
Components
| Perçe | HC1010A-01 | HC1010A-02 | HC1010A-03 | HC1010A-04 |
| 10× Taq Buffer | 2×1 ml | 2×10 ml | 2×50 ml | 5×200 ml |
| Taq DNA Polymerase (5 U/μL) | 0,1 ml | 1 ml | 5 ml | 5×10 ml |
Rewşa Storage
Veguheztin di bin 0°C de û di -25°C~-15°C de were hilanîn.
Unit Definition
Yekîneyek wekî mîqdara enzîma ku 15 nmol dNTP di nav 30 hûrdeman de di 75°C de di nav maddeya ku di asîdê de nayê çareser kirin vedihewîne tê pênase kirin.
Kontrola Kalîteyê
1.Lêkolîna Paqijiya Proteînê (SDS-PAGE):Paqijiya Taq DNA polymerase ≥95% ji hêla analîza SDS-PAGE ve hate destnîşankirin.
2.Endonuclease Çalakî:Kêmtirîn 5 U ya Taq DNA polymerase bi 1 μg λDNA ji bo 16 demjimêran di 37 ℃ de encam nade ku wekî ku hatî destnîşan kirin hilweşînek nayê tespît kirin.
3.Çalakiya Exonuclease:Kêmtirîn 5 U Taq DNA polîmeraza bi 1 μg λ -Hind Ⅲ ADN-ê ji bo 16 demjimêran di 37 ℃ de dişewitîne, wekî ku hatî destnîşan kirin, encam nagire.
4.Çalakiya Nickase:Kêmtirîn 5 U Taq DNA polîmeraza bi 1 μg DNA pBR322 ji bo 16 demjimêran li 37°C, wekî ku hatî destnîşan kirin, encam nagire.
5.Çalakiya RNase:Kêmtirîn 5 U Taq DNA polymerase bi 1,6 μg MS2 RNA ji bo 16 demjimêran li 37°C, wekî ku hatî destnîşan kirin, encam nagire.
6.E. coliDNA:5 U ya Taq DNA polymerase ji bo hebûna ADNya genomîkî ya E. coli bi karanîna TaqMan qPCR bi primerên taybetî yên ji bo cîhê E. coli 16S rRNA tê kontrol kirin.Têkçûna DNA ya genomîkî ya E. coli ≤1 Kopî ye.
7.Zêdekirina PCR (5.0 kb Lambda DNA)- Reaksiyonek 50 µL ya ku 5 ng Lambda DNA bi 5 yekîneyên Taq DNA Polymerase ji bo 25 çerxên zêdekirina PCR-ê vedihewîne, hilbera 5.0 kb ya hêvîdar encam dide.
Setup Reaksiyonê
| Components | Bend |
| Şablon DNAa | bixwe |
| 10 μM Pêşî Primer | 1 μL |
| 10 μM Reverse Primer | 1 μL |
| dNTP Mix (her 10mM) | 1 μL |
| 10× Taq Buffer | 5 μL |
| Taq DNA Polymeraseb | 0,25 μL |
| Ava bê nukleaz | Heta 50 μL |
Têbînî:
1) Pîvana reaksiyonê ya çêtirîn a şablonên cihêreng cûda ye.Tabloya jêrîn karanîna şablonê ya pêşniyarkirî ya pergala reaksiyonê ya 50 µL nîşan dide.
| DNA | Biha |
| Genomîk | 1 ng-1 μg |
| Plasmid an Viral | 1 pg-1 ng |
2) Di sepanên pispor de giraniya herî baş a Taq DNA Polymerase dikare ji 0,25 µL~1 µL be.
BersivîBername
| Gav | Germî(°C) | Dem | Cycles |
| Denaturasyona destpêkêa | 95 ℃ | 5 min | - |
| Denaturasyon | 95 ℃ | 15-30 s | 30-35 Cycles |
| Annealingb | 60 ℃ | 15 s | |
| Dirêjkirinî | 72 ℃ | 1kb/min | |
| Berfirehkirina Dawî | 72 ℃ | 5 min | - |
Têbînî:
1) Rewşa denaturasyonê ya destpêkê ji bo piraniya reaksiyonên amplifikasyonê maqûl e û dikare li gorî tevliheviya avahiya şablonê were guheztin.Ger avahiya şablonê tevlihev be, dema pêş-denaturasyonê dikare 5 - 10 hûrdem were dirêj kirin da ku bandora denaturasyonê ya destpêkê baştir bike.
2) Pêdivî ye ku germahiya şilkirinê li gorî nirxa Tm ya primerê were sererast kirin, ku bi gelemperî 3 ~ 5 ℃ ji nirxa Tm ya primerê kêmtir tête danîn;Ji bo şablonên tevlihev, pêdivî ye ku meriv germahiya lêdanê rast bike û dema dirêjkirinê dirêj bike da ku bigihîje xurtkirina bikêr.
