Yek Step RT-qPCR SYBR Kesk Premix
Hejmara pisîkê: HCB5140A
Yek Step RT-qPCR Syber Green Premix ji bo pîvandina floransê li ser bingeha rengê SYBR Green I ye.Bi karanîna primerên genê-taybetî, veguheztina berevajî û reaksiyonên qPCR di yek boriyekê de têne qedandin, hewcedariya dubarekirina operasyonên vekirina kapê û pîpkirinê ji holê radike, karûbarê ceribandinê pir baştir dike û xetera pîsbûnê kêm dike.Ji bo nimûneyên RNA, kît ji bo berhevkirina cDNA-ya bikêrhatî Transcriptase Reverse-berxwedêr û DNA Polymerase HotStart Taq ji bo zêdekirina mîqdar bikar tîne.Di bin pergala tamponê ya xweşbînkirî de, hesasiyeta kîtê dikare ji bo armancên pir diyarkirî bi qasî 0,1 pg û ji bo armancên bi nermî bi qasî 1 pg bilind be.Kit ji bo zêdekirin û pîvandina nimûneyên DNA-yê guncan e.Ew bi hestiyar vedîtin û pîvandina asîdên nukleîk ji nimûneyên nebat û heywanan, hucre û mîkroorganîzmayên cihêreng dihêle.
Components
| No | Nav | Bend | Bend |
| 1 | Tampon pêşketî | 250 μL | 2×1,25 mL |
| 2 | Têkeliya Enzîmê ya Pêşketî | 20 μL | 200 μL |
| 3 | RNase Belaş H2O | 250 μL | 2×1,25 mL |
Şertên Storage
Pêdivî ye ku ev hilber 1 sal li -25~-15℃ dûrî ronahiyê were hilanîn.
Instructions
Veavakirina pergala 1.Reactiond
| Components | Volume (μL) | Volume (μL) | Teqandina dawî |
| Tampon pêşketî | 12.5 | 25 | 1× |
| Têkeliya Enzîmê ya Pêşketî | 1 | 2 | - |
| Pêşverû (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0,2 μmol/L |
| Reverse Primer (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0,2 μmol/L |
| Tamplate RNAb | X | X | - |
| RNase Belaş H2Oc | heta 25 | heta 50 | - |
Têbînî:
1) a.Tew giraniya paşîn a pêşîn 0,2 μmol / L bû, ku di heman demê de dikare di navbera 0,1 û 1 μmol / L de wekî ku pêdivî ye were sererast kirin.
2) b.Reagent zehf hesas e, digel RNA-ya Total di nav rêza 1pg-1μg de, û ceribandina nimûneyên mirovî ketina çêtirîn 1 pg-100 ng destnîşan kir, ku nirxek Ct ya giştî di navbêna 15-30 de wekî ku pêdivî ye kontrol dike.
3) c.Tête pêşniyar kirin ku 20μL an 50μL bikar bînin da ku pêbawerî û dubarebûna zêdekirina genê armancê piştrast bikin.
4) d.Ji kerema xwe di bendika ultra-paqij de amade bikin û serişteyên bê bermahiyên nukleaz û lûleyên reaksiyonê bikar bînin;şîretên bi kartolên parzûnê têne pêşniyar kirin.Ji gemariya xaç û aerosolê dûr bixin.
2.Bernameya reaksiyonê
| Pêngava çerxê | Temp. | Dem | Cycles |
| Veguheztina berevajî | 50℃a | 6 min | 1 |
| Denaturasyona destpêkê | 95℃ | 5 min | 1 |
| Reaksiyona amplification | 95℃ | 15 sec | 40 |
| 60℃b | 30 sec | ||
| Qonaxa helandinê | Instrument Defaults | 1 | |
Têbînî:
1) a.Germahiya veguheztina berevajî dikare li gorî hewcedariyên ceribandinê di navbera 50-55 ° C de were hilbijartin.Ji bo nimûneyên DNA, pêvajoya veguhertina berevajî dikare were derxistin.
2) b.Di rewşên taybetî de germahiya lêdanê/dirêjkirinê dikare li gorî nirxa Tm a primer were sererast kirin, 60°C tê pêşniyar kirin.
Têbînî
1. Ev hilber tenê ji bo karanîna lêkolînê ye.
2. Ji kerema xwe ji bo ewlehiya xwe, bi kincên laboratûwar û destmalên yekcar kar bikin.
