2×HiF Taq plus Master Mix
Hejmara pisîkê: HCR2014B
HIF Taq plus Master Mix (With Dye) çareseriyek amade-karanîna 2×premixed e ku tê de Plus HIF DNA Polymerase, dNTP, û tampon xweşbînkirî ye.Du antîbodên monoklonal ên li germahiya odeyê ku çalakiya polîmerazê û çalakiya 3'→5'exonuclease asteng dikin, ji bo PCR-ya Destpêka Germ a bi hêsanî û pir taybetî li tevliheviya sereke têne zêdekirin.Faktora dirêjkirinê li mixa sereke tê zêdekirin da ku enzîmê kapasîteya zêdekirina perçeya dirêj bide, dirêjahiya zêdekirinê dikare heya 13 kb be, enzîm xwedî çalakiyek 5'→3' DNA polîmeraz e û 3'→5' heye. Çalakiya exonuclease, dilsoziya wê 83 carî ji ya Taq DNA polymerase ye, ku 9 carî ji ya DNA polymerase ya normal e.Ew ji bo zêdekirina şablonên tevlihev maqûl e, hilbera amplifikasyonê dawiya hişk e.
2×HIF Taq plus Master Mix (Bi Dye) xwedan avantajên bilez û hêsan, hesasiyeta bilind, taybetmendiya bihêz, aramiya baş, hwd., pergala reaksiyonê tenê hewce dike ku primmer û şablonan lê zêde bike, û dikare bi du-yek were zêdekirin. protokola gavê, hêsankirina gavên ceribandinê û xilaskirina demê.Ev hilber rengên nîşana elektroforezê dihewîne, û hilberên PCR rasterast ji bo elektroforezê têne bikar anîn.Digel vê yekê, hilber di heman demê de navgînek parastinê ya taybetî jî vedihewîne, ji ber vê yekê tevliheviya sereke dikare çalakiya domdar piştî cemidî-germkirinê ya dubare bidomîne.
Şertên Storage
Pêdivî ye ku hilber 1 sal li -25~-15℃ bêne hilanîn.
Specifications
| Taybetmendiya hilberê | Master Mix |
| Lisersekinî | 2× |
| Destpêka Germ | Destpêka Germ a çêkirî |
| Overhang | Ko |
| Leza reaksiyonê | Jêqetandin |
| Mezinahî (Berhema Dawî) | Heta 13 kb |
| Şertên ji bo veguhestinê | Qeşaya zuha |
| Cureyê hilberê | Pêşniyarên PCR-ya dilsoziya bilind |
Instructions
1.Pergala Reaksiyonê ya PCR
| Components | Volume (μL) |
| Şablon DNA | Lêtê |
| Destpêka pêşîn (10 μmol/L) | 2.5 |
| Reverse Primer (10 μmol/L) | 2.5 |
| 2×HIF Taq plus Master Mix | 25 |
| ddH2O | heta 50 |
2.Bikaranîna şablonên cihêreng pêşniyar kirin
| Cureyê şablonê | Parçeyên ji 1kb berbi 10 kb zêde bikin |
| Genomîk DNA | 50ng-200ng |
| Plasmid an ADNya Viral | 10 pg-20ng |
| cDNA | 1-2,5 μL (10% ji qebareya reaksiyonê ya dawîn a PCR derbas neke) |
3.Protokola Amplification
1) Protokola du-gav (şablona tevliheviyê)
| Pêngava çerxê | Temp. | Dem | Cycles |
| Denaturasyona destpêkê | 98℃ | 3 min | 1 |
| Denaturasyon | 98℃ | 10 sec | 30-35 |
| Dirêjkirinî | 68℃ | 30 çirk/kb | |
| Berfirehkirina dawî | 72℃ | 5 min | 1 |
2) Protokola sê-gav (protokola birêkûpêk)
| Pêngava çerxê | Temp. | Dem | Cycles |
| Denaturasyona destpêkê | 98℃ | 3 min | 1 |
| Denaturasyon | 98℃ | 10 sec | 30-35 |
| Annealing | 60℃ | 20 sec | |
| Dirêjkirinî | 72℃ | 30 çirk/kb | |
| Berfirehkirina dawî | 72℃ | 5 min | 1 |
3) Protokola Gradient Annealing (şablona tevliheviyê)
| Pêngava çerxê | Germî | Dem | Cycles |
| Denaturasyona destpêkê | 98℃ | 3 min | 1 |
| Denaturasyon | 98℃ | 10 sec | 15 (1℃ kêmkirina serê çerxê) |
| Gradient annealing | 70-55℃ | 20 sec | |
| Dirêjkirinî | 72℃ | 30 çirk/kb | |
| Denaturasyon | 98℃ | 10 sec |
20 |
| Annealing | 55℃ | 20 sec | |
| Dirêjkirinî | 72℃ | 30 çirk/kb | |
| Berfirehkirina dawî | 72℃ | 5 min | 1 |
Taybetmendiyên di bin protokola zêdekirina cûda de
| Protocol | Du-Gavek | Sê gav | Gradient annealing |
| Spec. | zû | medya | hêdî |
| Taybetmendî | bilind | medya | bilind |
| Hilberîna PCR | medya | bilind | medya |
| Rêjeya Detection | bilind | medya | bilind |
Têbînî
Ji kerema xwe PPE-ya pêwîst, cil û bergên laboratîfê yên weha li xwe bikin da ku tenduristî û ewlehiya we bicîh bikin!
