RT-LAMP Colormetric Master Mix HCB5204A
Ev hilber tampon reaksiyonê, RT-Enzîmên Mix (Bst DNA polymerase û transkriptaza berevajî ya berxwedêr li hember germê), Parastinên lyophilized û pêkhateyên rengê kromojen dihewîne.Ji bo bikar bînin, tenê Buffer bikar bînin, enzîma reaksiyonê û primerê têne tevlihev kirin û li şablonê têne zêdekirin;lêzêdekirina parastina lyophilized dikare rasterast be.Ew bi lyophilizerek ve hate girêdan û lyophilized, û dema ku bikar anîn tenê primers û şablon hatin zêdekirin.Ev kit tespîtek dîtbarî ya bilez û zelal a amplifikasyonê peyda dike, ku reaksiyona neyînî bi sor tê destnîşan kirin û reaksiyona erênî bi guheztina zer tê destnîşan kirin.
Perçe
| Perçe | HCB5204A-01 | HCB5204A-02 | HCB5204A-03 |
| Tampona Amplification bi navbeynkar (bi boyax) | 0,96 ml | 4,80 mL×2 | 9,60 mL×10 |
| RT-Enzymes Mix | 270 μL | 2,70 ml | 2,70 mL×10 |
| Parastina lyophilized | 0,96 mL×2 | 9,60 mL×2 | 9,60 mL×20 |
Applications
Ji bo zêdekirina îzotermîk a DNA an RNA.
Şertên Storage
Bi qeşaya hişk ve tê veguheztin, di -25~ -15℃ de tê hilanîn.Pir caran ji cemidan-germkirinê dûr bisekinin, hilber 12 mehan derbasdar e.
Protokol
1.Tampona reaksiyonê ya ku di germahiya odeyê de were bikar anîn bişewitînin.Bi kurtasî boriyan bizivirînin an jî çend caran lûleyan bizivirînin da ku bi tevahî tevlihev bibin, dûv re santrîfuj bikin da ku şilê berbi binê lûlê berhev bikin.
2.Amadekirina pergala reaksiyonê.Ev reagent dikare di du pergalên reaksiyonê de were amadekirin, tevliheviya reaksiyonê ya şil û tevliheviya pergala lyophilized.
1) Miksa reaksiyonê ya şilek amade bikin
| Perçe | Bend |
| Tampona Amplification bi navbeynkar (bi boyax) | 10 μL |
| RT-Enzymes Mix | 2,8 μL |
| 10 × Primer Mixa | 5 μL |
| Şablonên DNA/RNA b | × μL |
| Ava bê nukleaz | Heta 50 μL |
2) Pergala lyophilîzasyonê tevlihev dike
① Tevliheviya lyophilized amade bikin
| Perçe | Bend |
| Tampona Amplification bi navbeynkar (bi boyax) | 10 μL |
| Parastina lyophilized | 20 μL |
| RT-Enzymes Mix | 2,8 μL |
| Ava bê nukleaz | Heta 50 μL |
② Lyophilization: Miksa amadekirî di pergalek 50μL de hate lyophilîzekirin
③ Têkelê reaksiyonê amade bikin
| Perçe | Bend |
| Têkelê lyophilized | 1 perçe |
| 10 × Primer Mixa | 5 μL |
| Şablonên DNA/RNA b | × μL |
| Ava bê nukleaz | Heta 50 μL |
Têbînî:
1) a.10×Primer Mix : 16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4 μM Loop F/B;
2) b.DEPC (di avê de tê çareser kirin) ji bo templa asîdê ya nukleîk tê pêşniyar kirin.
1.Li 65°C ji bo 30-45 hûrdeman înkub bikin, ku li gorî dema reaksiyonê guheztina reng bi guncan dikare were dirêj kirin.
2.Li gor çavê rût zer erênî û sor jî neyînî bû.
Têbînî
1.Dibe ku xwê di binê lûleya tamponê de xuya bibe, bi kurtî bizivirîne an lûleyan çend caran bizivirîne da ku li germahiya odeyê bi tevahî tevlihev bibe.
2.Germahiya reaksiyonê dikare di navbera 62 ℃ û 68 ℃ de li gorî rewşa primers were xweş kirin.
3.Reagentên pakkirî divê demek dirêj li ber hewayê nemînin.
4.Reaksiyona veguheztina sor û zer bi guherîna pH ya pergala reaksiyonê ve girêdayî ye, ji kerema xwe çareseriya hilanînê ya asîda nucleic Tris bikar neynin, pêşniyar kirin ku ddH bikar bînin.2O asîda nukleîk a hilanîn;
5.Pêdivî ye ku ezmûn were standardîzekirin, di nav de amadekirina pergala reaksiyonê, lyophilîzasyon, û pêvajoya nimûneyê û pêvajoya zêdekirina nimûneyê;
6.Ji bo ku ji gemariyê dûr nekevin, tê pêşniyar kirin ku pergala reaksiyonê di rûngehek ultra-paqij de amade bikin, di nav şablonên din de li kapaxa dûmanê ya odeyê zêde bikin da ku ji destwerdana erênî ya derewîn dûr nekevin.
