DNase I (Rnase Belaş) (2u/ul)
Hejmara pisîkê: HC4007B
DNase I endonukleazek e ku dikare ADN-ya yek-an jî du-zindî bixapîne.Ew dikare girêdanên fosfodîester hîdrolîz bike da ku mono-û oligodeoksynukleotîdên ku komek 5'-fosfat û komek 3'-OH vedihewîne hilberîne.Rêjeya pH-ya xebatê ya çêtirîn a DNase I 7-8 e.Çalakiya DNase I bi Ca ve girêdayî ye2+û dikare ji hêla îyonên metal ên duvalent ên wekî CO ve were çalak kirin2, Mn2+, Zn2+, hwd. Di hebûna Mg2+, DNase Ez dikarim bi rasthatinî her cîhek ADN-ya dubendî bişkînim;Dema ku li cem Mn2+, DNase Ez dikarim li heman cihî ADN-ya dubendî biqelişe, bi 1-2 nukleotîdên ku derdikevê de, dawîn zeliqandî an dawiya asê çêbike.Ew dikare ji bo hilberandina nimûneyên RNA yên cihêreng were bikar anîn.
Components
| Nav | 1KU | 5KU |
| DNaseI ya Rekombînant (Bê-RNase) | 500 μL | 5 × 500 μL |
| Tampona Reaksiyonê ya DNase I (10×) | 1 ml | 5 × 1 ml |
Şertên hilanînê
Divê ev hilber 2 salan li -25~-15℃ were hilanîn.Ji kerema xwe ji dûbarekirina cemidî-germkirinê dûr bisekinin.
Instructions
Ji bo jêbirina DNA ji nimûneyên RNA tenê ji bo referansê tê sepandin.
1. Ji kerema xwe lûleyên santrîfujê yên bê RNase û serişteyên pipetê bikar bînin da ku pergala reaksiyonê ya jêrîn amade bikin:
| Components | Volume (μL) |
| Tampona Reaksiyonê ya DNase I (10×) | 1 |
| DNaselê rekombînant (bê-RNase) | 1 |
| ARN | X |
| ddH bê RNase2O | Heta 10 |
2. Şertên reaksiyonê wiha ne: 37 ℃, piştî 15-30 hûrdeman, 2,5 mM çareseriya EDTA zêde bikin û baş tevlihev bikin, paşê 65 ℃ 10 hûrdeman.Şablona pêvajokirî dikare ji bo ceribandinên paşîn ên RT-PCR an RT-qPCR, û hwd were bikar anîn.
Têbînî
1. DNase l ji denaturasyona fizîkî hesas e;Dema tevlihevkirinê, bi nermî lûleya ceribandinê berevajî bikin ûbaş bihejînin, bi xurtî nehejînin.
2. Dema ku tê bikaranîn divê enzîm di qutiya qeşayê de an jî li ser hemamek qeşayê were hilanîn û piştî karanîna tavilê di -20℃ de were hilanîn.
3. Ev hilber tenê ji bo karanîna lêkolînê ye.
4. Ji kerema xwe ji bo ewlehiya xwe, bi kincên laboratûwar û destmalên yekcar kar bikin.
