Multiplex qPCR Probe Premix
Hejmara pisîkê: HCB5051A
TaqMan multiplex qPCR Master Mix (Dye Based) çareseriyek pêş-çareseriyê ye ji bo zêdekirina PCR-ya jimareyî ya 2 × rast-demê ku bi hesasiyet û taybetmendiya bilind, ku bi rengê şîn e, û xwedan bandora lêvekirina nimûneyê ye, tête diyar kirin.Ev hilber reagentek pêş-tevlihevkirî ya 2× Mix e ku heya çar reaksiyonên PCR-ya mîqdar ên fluorescentî di yek reaksiyonê de rê dide.Ev hilber rêbaza antîpodê ya bi genetîkî hatî guheztin ji bo enzîma Taq-ê germ-destpêk vedihewîne, ku hesas û taybetmendiya zêdekirinê pir çêtir dike.Di heman demê de, vê hilberê tamponek pir-reaksiyonê bi kûr ve xweştir kiriye, ku dikare karbidestiya zêdekirina reaksiyonê baştir bike û bihêzkirina bandorker a şablonên kêm-konsantreyî bike.Ev hilber dikare ji bo genotyping û analîzên mîqdar ên multiplex were bikar anîn.
Specification
| Destpêka Germ | Destpêka germ a çêkirî |
| Metoda Detection | Vedîtina primer-sondê |
| Rêbaza PCR | qPCR |
| Polymerase | Taq DNA polymerase |
| Cureyê nimûneyê | DNA |
Şertên Storage
Hilber bi qeşa hişk tê şandin û 2 sal dikare li -25~-15℃ were hilanîn.
Instructions
1. ReaksîyonSîstem
| Components | Volume (μL) | Koncentrasyona dawî |
| 2× TaqMan multiplex qPCR Master Mix | 12.5 | 1× |
| Tevlihevkirina Primer (10 μmol/L) a | × | 0,1 - 0,5 μmol/L |
| Têkelê sondajê (10 μmol/L)b | × | 50 - 250 nmol/L |
| Boyaxa referansa Rox | 0.5 | 1× |
| Şablon DNA/cDNA | 1-10 | - |
| ddH2O | heta 25 | - |
Têbînî:Berî ku bikar bînin, bi baldarî tevlihev bikin da ku ji hejandina zexm bilbilên zêde dûr nekevin.
yek.Kêmbûna Primer: Primer Mix çend cot primera dihewîne, bi gelemperî her aşîkar bi giraniya dawîn 0,2 μmol/L û di heman demê de dikare di navbera 0,1 û 0,5 μmol/L de jî wekî guncaw were sererast kirin.
b.Kêmbûna sondajê: Probe Mix gelek sondajên bi nîşanên fluorescence yên cihêreng vedihewîne, û giraniya her sondajê dikare li gorî rewşa taybetî di navbera 50 û 250 nmol / L de were sererast kirin.
1.Referansê boyaxa Rox: Ew li ser amûra zêdekirina PCR-ya Real Time-ê wekî Applied Biosystems tê bikar anîn da ku xeletiya sînyala fluorescence ya ku di navbera bîran de hatî çêkirin rast bike;ev hilber referansa boyaxa Rox nagire.Ger hewce be Cas#10200 tê pêşniyar kirin.
2.Dilbûna şablonê: qPCR pir hesas e, û tê pêşniyar kirin ku şablonê ji bo karanînê were rijandin.Ger şablon çareseriyek stokê ya cDNA be, divê qebareya şablonê ji 1/10 ya qebareya giştî derbas nebe.
3.Pergala reaksiyonê: 25μL, 30μL an 50 μL tê pêşniyar kirin ku bandor û dubarebûna zêdekirina genê armancê misoger bike.
4.Amadekirina pergalê: Ji kerema xwe di bencê super paqij de amade bikin, û serişte û lûleyên reaksiyonê bêyî bermayiya nukleazê bikar bînin;tê pêşniyar kirin ku şîretan bi kartolên parzûnê re bikar bînin.Ji gemariya xaç û aerosolê dûr bixin.
2.Bernameya reaksiyonê
| Pêngava çerxê | Temp. | Dem | Cycles |
| Destpêk-denaturasyon | 95 ℃ | 5 min | 1 |
| Denaturasyon | 95 ℃ | 15 sec | 45 |
| Pîvankirin / Extension | 60 ℃ | 30 sec |
Têbînî:
1.Germbûn / Berfirehkirin: Germahî û dem dikare li gorî nirxa Tm ya pêşîn a sêwirandî bi rêkûpêk were sererast kirin.
2.Bidestxistina sînyala floransê: Dema wergirtina sînyala floransê ya ku ji bo amûrên vedîtina qPCR yên cihêreng hewce dike cûda ye, ji kerema xwe li gorî dema herî kêm destnîşan bikin.Dema çend amûrên hevpar wiha tê destnîşan kirin:
20 çirke: Biosystemên sepandî 7700, 7900HT, 7500 Fast
31 çirke: Biosystemên sepandî 7300
32 çirke: Biosystemên sepandî 7500
Têbînî
Ji kerema xwe PPE-ya pêwîst, cil û bergên laboratîfê yên weha li xwe bikin, da ku tenduristî û ewlehiya we misoger bikin!
