DNase I (Rnase Belaş) (5u/ul)
Hejmara pisîkê: HC4007A
DNase I (Deoksîrîbonukleaz I) endodeoksîrîbonukleazek e ku dikare ADN-ya yek an jî dubendî bişewitîne.Ew girêdanên fosfodîester nas dike û diqetîne ku monodeoksînukleotîd an oligodeoxynukleotîdên yek- an du-bendî bi komên fosfatê li 5'-termînalê û hîdroksîl li 3'-termînalê hilberîne.Çalakiya DNase I bi Ca ve girêdayî ye2+û dikare ji hêla îyonên metal ên duvalent ên wekî Mn ve were çalak kirin2+û Zn2+.5 mM Ca2+enzîmê ji hîdrolîzê diparêze.Di hebûna Mg2+, enzîm dikare bi rasthatinî her cîhek li ser her zincîra DNAyê nas bike û biqetîne.Bi amadebûna Mn2+, zincîrên ducarî yên ADNyê dikarin bi hevdemî werin nas kirin û hema hema li heman cîhê werin qut kirin da ku perçeyên DNA yên dawiya paşîn an perçeyên DNA yên dawiya asê yên bi 1-2 nukleotîdên ku derketine pêş ve bibin.
Components
| Nav | 0.1 KU | 1KU | 5 KU | 50 KU |
| DNase I, bê RNase | 20 μL | 200 μL | 1mL | 10 ml |
| 10×DNase I Buffer | 1mL | 1mL | 5 × 1 ml | 5 × 10 ml |
Şertên hilanînê
-25℃~-15℃ ji bo hilanînê;Veguheztin di bin pakêtên qeşayê de.
Instructions
1. Di lûleya bê-RNase de çareseriya reaksiyonê li gorî nîsbetên ku li jêr hatine rêz kirin amade bikin:
| Perçe | Bend |
| ARN | X μg |
| 10 × DNase I Buffer | 1 μL |
| DNase I, bê RNase (5U/μL) | 1 U her μg RNA① |
| ddH2O | Heta 10 μL |
Nîşe: ①Hejmara DNase I ya ku divê were zêdekirin li gorî mêjera ARNyê hesab bike.
2. 37 ℃ ji bo 15 deqîqeyan;
3. 0.5M EDTA bi 2.5mM~5mM ya dawî ve zêde bikin, û 10 hûrdeman li 65℃ germ bikin da ku reaksiyonê rawestînin.Nimûne dikare rasterast ji bo reaksiyona paşîn wekî veguheztina berevajî were bikar anînceribandinî.
Unit Definition
Yekîneyek wekî mîqdara enzîma ku dê 1 μg ji pBR322 bi tevahî hilweşîne tê destnîşankirin.DNA di 10 deqîqeyan de di 37℃ de.
Kontrola Kalîteyê
RNase:5U ji DNase I bi 1,6 μg MS2 RNA ji bo 4 saetan di 37℃ de tu hilweşandinê dernakeve.bi elektroforezê gel agarose ve tê destnîşankirin.
Têbînî
1. Ji kerema xwe 0.5MEDTA bi xwe amade bikin.
2. Ji bo her µg RNA 1U DNase I bikar bînin.Lêbelê, heke RNA ji 1 μg kêmtir e, ji kerema xwe 1U DNase I bikar bînin.
3. Ji kerema xwe di dema xebatê de enzîmê bixin ser qeşayê.
