2× Rapid Taq Super Mix
Hejmara pisîkê: HCR2016A
2×Rapid Taq Super Mix li ser bingeha Taq DNA Polymerase-ya guhertî ye, faktora dirêjkirina bihêz, faktora zêdekirina amplîfasyonê û pergala tamponê ya xweşbînkirî, bi karbidestiya xurtkirina super bilind zêde dike.Leza zêdekirina şablonên tevlihev ên wekî genom di nav 3 kb de digihîje 1-3 saniye/kb, û ya şablonên sade yên mîna plasmîdên di nav 5 kb de digihîje 1 sec/kb.Ev hilber dikare pir wextê reaksiyonê PCR xilas bike.Di heman demê de, tevlihev dNTP û Mg2+ dihewîne, ku tenê bi lêzêdekirina primers û şablonan dikare were zêdekirin, ev jî gavên operasyonê yên ceribandinê pir hêsan dike.Digel vê yekê, tevlîhev rengê nîşana elektroforetîkî heye, ku piştî reaksiyonê rasterast dikare elektroforez bibe.Hêza parastinê ya di vê hilberê de dihêle ku tevlihev piştî cemidandin û şilbûna dubare çalakiya stabîl bidomîne.Bandora 3'-dawiya A ya hilbera PCR dikare bi hêsanî di vektora T de were klon kirin.
Components
2× Rapid Taq Super Mix
Şertên Storage
Berhemên PCR Master Mix divê 2 salan li -25~-15℃ bêne hilanîn.
Specifications
| Taybetmendiya hilberê | Rapid Taq Super Mix |
| Lisersekinî | 2× |
| Destpêka Germ | Destpêka Germ a çêkirî |
| Overhang | 3'-A |
| Leza reaksiyonê | Jêqetandin |
| Mezinahî (Berhema Dawî) | Heta 15 kb |
| Şertên ji bo veguhestinê | Qeşaya zuha |
Instructions
1. Pergala Reaksiyonê (50 μL)
| Components | Mezinahî (μL) |
| Şablon DNA* | lêtê |
| Destpêka pêşîn (10 μmol/L) | 2.5 |
| Destpêka berevajî (10 μmol/L） | 2.5 |
| 2× Rapid Taq Super Mix | 25 |
| ddH2O | heta 50 |
2.Protokola Amplification
| Gavên çerxê | Germahiya (°C) | Dem | Cycles |
| Predenaturation | 94 | 3 min | 1 |
| Denaturasyon | 94 | 10 sec |
28-35 |
| Annealing | 60 | 20 sec | |
| Dirêjkirinî | 72 | 1-10 çirk/kb |
Pêşniyarkirina karanîna şablonên cihêreng:
| Cureyê şablonê | Rêjeya karanîna beşê (pergala reaksiyonê ya 50 μL) |
| ADNya genomîk an jî şilek E. coli | 10-1000 ng |
| Plasmîd an DNAya vîrus | 0,5-50 ng |
| cDNA | 1-5 μL (ji 1/10 ya tevayî ya reaksiyona PCR ne zêdetir) |
| Bikaranîna şablonên cihêreng pêşniyar kirin | |
Têbînî:
1.Bikaranîna reagentê: berî bikar anînê bi tevahî şil bikin û tevlihev bikin.
2. Germahiya lêdanê: Germahiya lêdanê nirxa Tm ya gerdûnî ye, û di heman demê de dikare 1-2℃ ji nirxa Tm a destpêkê jî kêmtir were danîn.
3. Leza dirêjkirinê: Ji bo şablonên tevlihev ên wekî genom û E. coli di nav 1 kb de 1 sec/kb destnîşan bikin;3 sec/kb ji bo şablonên tevlihev ên wekî genom 1-3 kb û E. coli saz bikin;10 sec/kb ji bo şablonên tevlihev ên li ser 3 kb genom û E. coli saz bikin.Hûn dikarin ji bo şablonek hêsan wek plasmîdek ji 5 kb kêmtir nirxê 1 saniye/kb, ji bo şablonek sade wek plasmîd di navbera 5 û 10 kb de 5 saniye/kb, û ji bo şablonek hêsan 10 saniye/kb. wek plasmîdeke ji 10 kb mezintir.
Têbînî
1. Ji bo ewlekarî û tenduristiya we, ji kerema xwe ji bo xebatê kincên laboratûwar û destikên yekcar li xwe bikin.
2. Ev hilber TENÊ ji bo karanîna lêkolînê ye!
