2×PCR Master Mix (bê Dye)
PCR Master Mix celebek çareseriyek kevneşopî ya PCR-ya premixed e ku amade ye ku bikar bîne, di nav de Taq DNA Polymerase, dNTP mix MgCl2 û tampon xweşbînkirî.Di dema reaksiyonê de, tenê prim û şablon dikare ji bo zêdekirinê were zêdekirin, ku ev gavên operasyonê yên ceribandinê pir hêsan dike.Ev hilber stabîlîzkerên hêja dihewîne û dikare 3 mehan di 4℃ de were hilanîn.Hilbera PCR xwedan pêşbirka 3'-dA ye û dikare bi hêsanî di vektora T de were klon kirin.
Şertên Storage
Pêdivî ye ku hilber du salan li -25℃~ -15℃ were hilanîn.
Specifications
| Fidelity (vs.Taq) | 1× |
| Destpêka Germ | No |
| Overhang | 3'-A |
| Polymerase | Taq DNA Polymerase |
| Forma Reaksiyonê | SuperMix an Master Mix |
| Leza Reaksiyonê | Rêzan |
| Type Product | PCR Master Mix (2×) |
Instructions
1.Pergala Reaksiyonê
| Components | Mezinahî (μL) |
| Şablon DNA | Lêtê |
| Primer 1 (10 μmol/L) | 2 |
| Primer 2 (10 μmol/L) | 2 |
| PCR Master Mix | 25 |
| ddH2O | Heta 50 |
2.Protokola Amplification
| Gavên çerxê | Germahiya (°C) | Dem | Cycles |
| Pre-denaturation | 94 ℃ | 5 min | 1 |
| Denaturasyon | 94 ℃ | 30 sec | 35 |
| Annealing | 50-60 ℃ | 30 sec | |
| Dirêjkirinî | 72 ℃ | 30-60 sec/kb | |
| Berfirehkirina Dawî | 72 ℃ | 10 min | 1 |
Têbînî:
1) Bikaranîna şablonê: 50-200 ng DNA genomîk;0,1- 10 ng DNAya plazmîdê.
2) Mg2+konsantasyon: Ev hilber 3 mM MgCl2 heye ku ji bo piraniya reaksiyonên PCR-ê guncan e.
3) Germahiya lêdanê: Ji kerema xwe nirxa Tm ya teorîkî ya Primer binihêrin.Germahiya lêdanê dikare 2-5 ℃ ji nirxa teorîkî ya primerê kêmtir were danîn.
4) Dema dirêjkirinê: Ji bo nasnameya molekular, 30 sec / kb tê pêşniyar kirin.Ji bo klonkirina genê, 60sec/kb tê pêşniyar kirin.
Têbînî
1.Ji bo ewlekarî û tenduristiya we, ji kerema xwe ji bo xebatê kincên laboratîf û destikên yekcar li xwe bikin.
2.Tenê ji bo lêkolînê bikar bînin!
