Destpêka Germ Bst 2.0 DNA Polymerase (Bê glycerol)
Bst DNA polymerase V2 ji Bacillus stearothermophilus DNA Polymerase I, ku xwedan çalakiya 5'→3' DNA polymerase û çalakiya veguheztina zincîra bihêz e, lê çalakiya exonuclease 5'→3' tune ye.Bst DNA Polymerase V2 bi îdeal ji bo jicîhûwarkirina stûnê, LAMP zêdekirina îzotermîk (Zêdekirina îzotermal a bi navbeynkariya Loop) û rêzgirtina bilez guncan e.Bst DNA polymerase V2 guhertoyek destpêkek germ e ku li ser bingeha Bst DNA polîmeraza V2 (HC5005A) ye ku ji hêla teknolojiya guheztinê veguhezbar ve hatî wergirtin, ku dikare çalakiya DNA polymerase di germahiya odeyê de asteng bike, ji ber vê yekê pergala reaksiyonê dikare li germahiya odeyê were xebitandin û formulekirin da ku pêşî li nerazîbûnê bigire. -Amplification taybet û baştirkirina bertekên reaksiyonê, û ev guherto dikare lyophilized.Digel vê yekê, çalakiya wê di germahiyên bilind de tê berdan, ji ber vê yekê ne hewce ye ku gavek çalakkirina cihêreng.
Components
| Perçe | HC5006A-01 | HC5006A-02 | HC5006A-03 |
Bst DNA polymerase V2 (bê glycerol) (8U/μL) | 0,2 ml | 1 ml | 10 ml |
| 10×HC Bst V2 Tampon | 1,5 ml | 2×1,5 mL | 3×10 ml |
| MgSO4(100mM) | 1,5 ml | 2×1,5 mL | 2×10 ml |
Applications
1.Amplification isotermal LAMP
2.Reaksiyonek jicîhûwarkirina yek bendika DNA
3.Rêzkirina genê GC ya bilind
4.Rêzkirina DNA ya asta nanogram.
Rewşa Storage
Veguheztin di bin 0°C de û di -25°C~-15°C de were hilanîn.
Unit Definition
Yekînek wekî mîqdara enzîma ku 25 nmol dNTP di 30 hûrdeman de di 65°C de di nav maddeya ku di asîdê de nayê çareser kirin de vedihewîne tê pênase kirin.
Kontrola Kalîteyê
1.Lêkolîna Paqijiya Proteînê (SDS-PAGE):Paqijiya Bst DNA polymerase V2 ≥99% ji hêla analîza SDS-PAGE ve bi karanîna tespîta Coomassie Blue ve tê destnîşankirin.
2.EndonucleaseÇalakî:Inkubasyona reaksiyonek 50 μL ya ku herî kêm 8 U Bst DNA polîmeraza V2 bi 1 μg λDNA ji bo 16 demjimêran di 37 ℃ de vedihewîne, wekî ku hatî destnîşan kirin, encam nagire.
3.Çalakiya Exonuclease:Inkubasyona reaksiyonek 50 μL ya ku herî kêm 8 U Bst DNA polîmeraza V2 bi 1 μg λ-Hind Ⅲ ADN-ê dişewitîne ji bo 16 demjimêran di 37 ℃ de, wekî ku hatî destnîşan kirin, encam nagire.
4.Çalakiya Nickase:Inkubasyona reaksiyonek 50 μL ya ku herî kêm 8 U Bst DNA polîmeraza V2 bi 1 μg DNA pBR322 ji bo 16 demjimêran li 37°C vedihewîne, wekî ku hatî destnîşan kirin, encam nagire.
5.Çalakiya RNase:Inkubasyona reaksiyonek 50 μL ya ku herî kêm 8 U Bst DNA polîmeraza V2 bi 1.6 μg MS2 RNA heye ji bo 16 demjimêran li 37 ° C, wekî ku hatî destnîşan kirin, encam nagire.
6.E. coliDNA:120 U ji Bst DNA polîmeraza V2 ji bo hebûna ADNya genomîkî ya E. coli bi karanîna TaqMan qPCR bi primerên taybetî yên ji bo cîhê E. coli 16S rRNA tê kontrol kirin.Têkçûna DNA ya genomîkî ya E. coli ≤1 Kopî ye.
Reaksiyona LAMP
| Components | 25μL |
| 10×HC Bst V2 Tampon | 2,5 μL |
| MgSO4 (100mM) | 1,5 μL |
| dNTP (her yek 10mM) | 3,5 μL |
| SYTO™ 16 Kesk (25×)a | 1.0 μL |
| Primer mixb | 6 μL |
| Bst DNA Polymerase V2 (Bê Glîserol) (8 U/uL) | 1 μL |
| Şablon | × μL |
| ddH2O | Heta 25 μL |
Têbînî:
1) a.SYTOTM 16 Kesk (25×): Li gorî hewcedariyên ceribandinê, rengên din dikarin wekî cîhgir werin bikar anîn;
2) b.Tevlihevkirina Primer: bi tevlihevkirina 20 μ M FIP, 20 μ M BIP, 2,5 μ M F3, 2,5 μ M B3, 5 μ M LF, 5 μ M LB û cildên din tê wergirtin.
Reaksîyon û Rewş
1 × HC Bst V2 Tampon, germahiya inkubasyonê di navbera 60°C û 65°C de ye.
Heat Inactivation
80°C, 20 min
