Kîta derxistina DNA/RNA ya vîrusê
Ev kît ji bo derxistina bilez a ADN/RNA ya vîrusê ya paqijiya bilind ji nimûneyên wekî şûvên nasopharyngeal, şûvên hawîrdorê, supernatantên çanda şaneyê, û supernatantên homojen ên tevnvî re maqûl e.Kit li ser bingeha teknolojiya paqijkirina membrana silica ye ku hewcedariya karanîna fenol / kloroformên organîk an barîna alkolê ya dem-xwar ji holê radike ji bo derxistina DNA / RNA ya vîrusê ya qalîteya bilind.Asîdên nukleîk ên ku hatine bidestxistin bê nepakî ne û ji bo ceribandinên jêrîn ên wekî veguheztina berevajî, PCR, RT-PCR, PCR-ya rast-ê, rêzgirtina nifşa paşîn (NGS), û blota bakur amade ne.
Şertên hilanînê
Li 15 ~ 25 ℃ hilînin, û li germahiya odeyê veguhezînin
Components
Components | 100RXNS |
Buffer VL | 50 ml |
Tampon RW | 120 ml |
ddH2 O bê RNase | 6 ml |
Stûnên RNA FastPure | 100 |
Tubeyên berhevkirinê (2ml) | 100 |
Tubên Koleksiyonê yên bê RNase (1 .5ml) | 100 |
Buffer VL:Jîngehek ji bo lîz û girêdanê peyda bikin.
Tampon RW:Proteînên bermayî û nepakiyên din jê bikin.
ddH2O bê RNase:ADN/ARN ji parzûna di stûna spinê de hildiweşîne.
Stûnên RNA FastPure:Bi taybetî ADN/ARN-ê veşêre.
Tubeyên berhevkirinê 2 ml:Parzûnê berhev bikin.
Tubên Koleksiyonê yên bê RNase 1,5 ml:ADN/RNA berhev bikin.
Applications
Swabên nasopharyngeal, swabên hawirdorê, supernatantên çanda hucreyê, û supernatantên homojen ên tevnê.
Xwe amade Materials
Serişteyên pipetê yên bê RNase, lûleyên santrafîjê yên bê RNase, 1,5 ml, santrîfuj, mîkserê vortexê û pîpetan.
Pêvajoya Ceribandinê
Hemî gavên jêrîn di kabîneyek biyoewlehiyê de pêk bînin.
1. 200 μl ji nimûneyê têxin lûleya santrafûjê ya bê RNase (bi PBS an jî %0,9 NaCl heke nimûneya kêm nebe), 500 μl Buffer VL lê zêde bikin, 15 – 30 saniyeyan bi dorvekirinê baş tevlihev bikin û santrîfuj bikin. bi kurtî ji bo berhevkirina têkelê li binê boriyê.
2. Stûnên RNA yên FastPure di lûleyên berhevokê yên 2 ml de bi cîh bikin.Têkelê ji Gav 1 veguhezînin Stûnên RNA FastPure, 1 hûrdem bi 12,000 rpm (13,400 × g) santrîfuj bikin, û filtratê bavêjin.
3. 600 μl Buffer RW li Stûnên RNA FastPure zêde bikin, 30 saniye bi 12,000 rpm (13,400 × g) santrîfuj bikin û filtratê bavêjin.
4. Gav 3 dubare bikin.
5. Stûna vala bi 12,000 rpm (13,400 × g) 2 deqeyan santrîfuj bikin.
6. Stûnên FastPure RNA bi baldarî veguhezînin lûleyên berhevkirî yên bê RNase yên 1,5 ml (di kîtê de têne peyda kirin), û bêyî ku dest bi stûnê bikin 30 – 50 μl ddH2O bê RNase li navenda parzûnê zêde bikin.Bihêlin ku 1 hûrdeman li germahiya odeyê bimîne û 1 hûrdem di 12,000 rpm (13,400 × g) de santrîfuj bikin.
7. Stûnên RNA FastPure ji holê rakin.ADN/RNA dikare rasterast ji bo ceribandinên paşerojê were bikar anîn, an jî ji bo demek kurt li -30-15 °C an ji bo demek dirêjtir -85-65 °C were hilanîn.
Têbînî
Tenê ji bo lêkolînê bikar bînin.Ne ji bo karanîna di prosedurên tespîtkirinê de ye.
1. Nimûneyên pêşî li germahiya odeyê hevseng bikin.
2. Vîrus pir enfeksiyonê ne.Ji kerema xwe berî ceribandinê hemî tedbîrên ewlehiyê yên pêwîst werin girtin.
3. Xwe ji cemidandin û şilbûna dubare ya nimûneyê dûr bixin, ji ber ku ev yek dibe sedema hilweşandin an kêmbûna hilberîna ADN/RNA ya vîrusê ya ku hatiye derxistin.
4. Amûrên xwe-amade şîretên pîpeta bê RNase, lûleyên santrafîjê yên bê RNase yên 1,5 ml, santrîfuj, mîkserê vortexê û pîpetan hene.
5. Dema ku kîtê bikar tînin, kirasê laboratûvarê, destikên lateksê yên yekcar, û maskek yekcar li xwe bikin û madeyên bêserûber ên RNase bikar bînin da ku xetera gemarbûna RNase kêm bikin.
6. Hemî gavan li germahiya odeyê pêk bînin heya ku wekî din diyar nebe.
Mekanîzma & Karûbar