Ultra Nuclease
UltraNuclease endonuclaese endezyariya genetîkî ye ku ji Serratia marcescens hatî çêkirin, ku dikare ADN an RNA-yê, duqat an tekane, xêzik an dorhêlî di bin şertek berfireh de hilweşîne, asîdên nukleîk bi tevahî di nav oligonukleotîdên dirêjahiya 5'-monofosfat de bi dirêjahiya 3-5base. .Piştî guheztina endezyariya genetîkî, hilber di Escherichia coli (E. coli) de hate femkirin, eşkerekirin, û paqij kirin, ku vîskozîtîya lêkolîna zanistî ya supernatant û lîzata hucreyê kêm dike, lê di heman demê de kargêriya paqijkirinê û lêkolîna fonksiyonel a proteînê jî baştir dike.Di heman demê de ew dikare di tedawiya genê, paqijkirina vîrusê, hilberîna vakslêdanê, pîşesaziya dermansaziya proteîn û polysaccharide de wekî reagentek rakirina asîda nukleîk a bermayî ya mêvandar were bikar anîn.
taybetmendiyên Product
| CAS No. | 9025-65-4 |
| EC No. | |
| Giraniya molekulî | 30kDa |
| Xalê Îzoelektrîkê | 6.85 |
| Paqijiya Protein | ≥99% (SDS-PAGE & SEC-HPLC) |
| Çalakiya taybetî | ≥1.1×106U/mg |
| OptimumTemperature | 37°C |
| PH optimum | 8.0 |
| ProteaseActivity | nebaş |
| Bioburden | ＜10CFU/100,000U |
| Proteîna Host-hucreya Bermayî | ≤10ppm |
| Heavy Metal | ≤10ppm |
| Endotoksîna Bakterî | ＜0.25EU/1000U |
| Storage Buffer | 20mM Tris-HCl, pH 8.0, 2mM MgCl2, 20mM NaCl, 50% Glycerol |
Şertên hilanînê
Veguheztin ≤0°C；-25~-15°C hilanîn, 2 sal derbasdarbûn (ji cemidan-germkirinê dûr bixin).
Unit Definition
Mîqdara enzîma ku ji bo guheztina nirxa vegirtinê ya △A260 bi 1.0 di nav 30 hûrdemî de li 37 °C, pH 8.0 tê bikar anîn, bi qutkirina oligonukleotîdên ADNya spermê 37 μg re, wekî yekîneyek çalak (U) hate destnîşankirin.
Kontrola kalîteyê
Proteîna Host-hucreya Bermayî: Kîta ELISA
•Protease Residues: 250KU/mL UltraNuclease 60min bi substratê re bertek nîşan da, tu çalakî nehat dîtin.
•Endotoksîna Bakterî: LAL-Test, Pharmacopoeia ya Komara Gel a Chinaînê Cild 4 (Çapa 2020) Rêbaza ceribandina sînorê gel.Qanûnên Giştî (1143).
•Bioborden: Pharmacopoeia of the Republic of China Volume 4 (Çapa 2020) - Giştî
Rêbazên Ji bo Testa Sterility (1101), Standarda Neteweyî ya PRC, GB 4789.2-2016.
•Heavy Metal:ICP-AES, HJ776-2015.
Emelî
Çalakiya UltraNuclease bi girîngî hate asteng kirin dema ku giraniya SDS ji% 0.1 an EDTA bû.
giranî ji 1mM zêdetir bû.Surfactant Triton X-100, Tween 20 û Tween 80 tu bandorek li ser nukleazê nekirin.
taybetmendî dema ku hûrbûn di binê 1,5% de bû.
| Emelî | Operasyona Optimal | Operasyona Derbasdar |
| Germî | 37℃ | 0-45℃ |
| pH | 8.0-9.2 | 6.0- 11.0 |
| Mg2+ | 1-2 mM | 1- 15 mM |
| DTT | 0-100mM | > 100mM |
| 2-Merkaptoetanol | 0-100mM | > 100mM |
| Iyona metal a monovalent (Na+, K+ hwd.) | 0-20 mM | 0-200 mM |
| PO43- | 0-10mM | 0-100mM |
Bikaranîna û Dosage
• Asîda nukleîîk a biyanî ji berhemên derziyê derxîne, xetereya jehrîbûna asîda nukleîk a bermayî kêm bike û ewlehiya hilberê baştir bike.
• Vîskozîteya şilava xwarinê ya ku ji ber asîdê nukleîk çêdibe kêm bike, dema pêvajoyê kurt bike û hilberîna proteînê zêde bike.
• Asîda nukleîk a ku parçika pêça (vîrûs, laşê tevlêbûnê, hwd.), ku guncan e, derxe.
ji bo berdan û paqijkirina parçikê.
| Tîpa Ezmûnî | Hilberîna Protein | Vîrus, derziyê | Dermanên Hucreyê |
| Hejmara şaneyan | 1 g giraniya şil a hucreyê (bi 10 ml tampon ji nû ve tê sekinandin) | 1L fermentasyon supernatant şil | Çanda 1L |
| Doza herî kêm | 250U | 100U | 100U |
| Doza Pêşniyar kirin | 2500U | 25000U | 5000U |
• Tedawiya nukleazê dikare çareserî û vegerandina nimûneyê ji bo kromatografiya stûnê, elektroforez û analîza blotê çêtir bike.
• Di tedawiya genê de, asîda nukleîk tê rakirin da ku vîrusên adeno-girêdayî yên paqijkirî werin bidestxistin.
