2×PCR Super Mix (bi Dye)
2× PCR Master Mix dihewîne Taq DNA Polymerase, dNTPs, û hêmanên din ên PCR-ê hewce ne.Master Mix ji bo 3 mehan li 4℃ bi stabilîzatorên meyên xwerû re stabîl e.Çareseriya pêş-miksê ji bo PCR-ya konvansiyonel xweşbîn e û bi lêzêdekirina şablon û primerên DNA-yê amade ye ku bikar bîne.Berhemên PCR dikarin rasterast ji bo elektroforezê bi boyaxa şîn a bromfenolê ya berê-barkirî werin barkirin.Berhemên zêdekirî 3 '-dA protrusion hene û bi hêsanî di vektora T-yê de têne klon kirin.2×PCR Master Mix pêvajoya PCR hêsan dike û gemariyê kêm dike.
Şertên Storage
Divê hilber 2 salan li -25℃~-15℃ bêne hilanîn.
Specifications
| Fidelity (vs.Taq) | 1× |
| Destpêka Germ | No |
| Overhang | 3 '-A |
| Polymerase | Taq DNA Polymerase |
| Forma Reaksiyonê | SuperMix an Master Mix |
| Leza Reaksiyonê | Rêzan |
| Type Product | PCR Master Mix (2x) |
Instructions
1.Pergala Reaksiyonê
| Components | Bend(μL) |
| Şablon DNA | Lêtê |
| Primer 1 (10 μmol/L) | 2 |
| Primer 2 (10 μmol/L） | 2 |
| 2× PCR Master Mix | 25 |
| ddH2O | heta 50 |
2.Protokola Amplification
| Gavên çerxê | Germahiya (°C) | Dem | Cycles |
| Denaturasyona destpêkê | 94 | 5 min | 1 |
| Denaturasyon | 94 | 30 sec | 35 |
| Annealing | 50-60 | 30 sec | |
| Dirêjkirinî | 72 | 30-60 saniye/kb | |
| Berfirehkirina dawî | 72 | 10 min | 1 |
Not:
1) Bikaranîna şablonê: 50-200ng DNA genomîk;0,1-10ng DNAya plazmîdê.
2) Mg2+konsantasyon: Ev hilber 3mM MgCl2 dihewîne, ku ji bo piraniya reaksiyonên PCR guncan e.
3) Germahiya lêdanê: Ji kerema xwe nirxa Tm ya teorîkî ya primers binihêrin.Germahiya lêdanê dikare 2-5 ℃ ji nirxa teorîkî ya primerê kêmtir were danîn.
4) Dema dirêjkirinê: Ji bo nasnameya molekular, 30 sec / kb tê pêşniyar kirin.Ji bo klonkirina genê, 60 sec/kb tê pêşniyar kirin.
Têbînî
1.Berhemên PCR ên bi 2× PCR Master Mix ji bo elektroforeziya gel a polyacrylamide ne guncan in.
2.Ji bo ewlekarî û tenduristiya we, ji kerema xwe ji bo xebatê kincên laboratîf û destikên yekcar li xwe bikin.
3.Ew TENÊ ji bo karanîna lêkolînê tê bikar anîn!
